Genová exprese IL 10 v neutrofilech pupečníkové krve dětí zdravých a alergických matek

Abstract

Předmětem bakalářské práce je stručné shrnutí poznatků o neutrofilech se zaměřením na nedávno popsané subpopulace neutrofilů a porovnání genové exprese IL-10 neutrofilech izolovaných z pupečníkové krve novorozenců zdravých a alergických matek. Teoretická část bakalářské práce popisuje obecně neutrofily a jejich zařazení do imunitního systému, jednotlivé subpopulace neutrofilů a jejich funkce. Dále se v bakalářské práci věnuji stručnému popisu alergických nemocnění a jednotlivým příkladům alergických onemocnění. Následně se v práci zabývám predispozicí k alergickým onemocněním, možným vlivem mikrobioty na alergické onemocnění, a především rolí interleukinu (IL) IL-10 a neutrofilů u alergií. Poslední část je věnována T lymfocytům se zaměřením na subpopulace T lymfocytů hrajících důležitou roli u alergií. V praktické části popisuji odběr materiálu, jednotlivé reagencie a materiál potřebný pro separaci neutrofilů, izolaci ribonukleové kyseliny (RNA) a vlastní stanovení genové exprese IL-10, včetně popisu metodiky polymerázové řetězové reakce (PCR) v reálném čase. Získané výsledky ukázaly, že není signifikantní rozdíl v genové expresi IL-10 v neutrofilech pupečníkové krve dětí zdravých matek (děti s relativně nízkým rizikem vzniku alergie) a alergických matek (děti s relativně vysokým rizikem vzniku alergie). Zdá se, že genová exprese IL-10 v neutrofilech pupečníkové krve nebude zřejmě vhodným znakem pro predikci vyššího rizika rozvoje alergického onemocnění.

The aim of this thesis is a brief summary of knowledge about neutrophils with a focus on recently described subpopulations of neutrophils and a comparison of IL-10 gene expression in neutrophils isolated from cord blood of newborns of healthy and allergic mothers. The theoretical part of the thesis describes neutrophils in general, classification into the immune system, individual subpopulations of neutrophils and their functions. Furthermore, in my thesis I focus on a brief description of allergic diseases and particular examples of allergic diseases. Then I deal with the predisposition to allergic diseases, the possible influence of microbiota on allergic diseases, and especially the role of interleukin (IL) IL-10 and neutrophils in allergies. The last part is devoted to T lymphocytes with a focus on subpopulations of T lymphocytes playing important role in allergies. In the practical part, I describe the collection of material, particular reagents and material needed for neutrophil separation, ribonucleic acid (RNA) isolation and determination of gene expression of IL-10 itself, including a description of methodology of quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR). The results obtained show that there is no significant difference in the expression of IL-10 in the cord blood neutrophils of children of healthy mothers (children at relatively low risk of allergy development) and allergic mothers (children at relatively high risk of allergy development). It appears that gene expression of IL-10 in cord blood of neutrophils is unlikely to be a suitable marker for predicting a higher risk of developing allergic disease.