Endokrinní disruptory - monitorování a jejich působení na lidské zdraví

Abstract

Bakalářská práce pojednává o endokrinních disruptorech. Teoretická část se věnuje definici, klasifikaci a výskytu. Dále popisuje mechanismy působení endokrinních disruptorů na lidské zdraví, především na pohlavní soustavu muže a ženy a současně poskytuje základní informace o možných následcích expozice. Uvedeny jsou i diagnostické metody monitorování těchto látek. Experimentální část byla realizována v laboratoři buněčných kultur a byla zaměřena na zvládnutí technik nutných pro laboratorní práci s buněčnými kulturami (sterilní práce v laminárním boxu, příprava růstových médií, zajištění růstových podmínek, následně příprava preparátů a počítání buněk v Bürkerově komůrce). Následně byly testovány účinky parfémované vody, jakožto endokrinního disruptoru, na buněčnou kulturu a sledovala se mikroskopicky jejich aktivita v časových intervalech po 24 hodinách, 3 dnech a 7 dnech. Ke stanovení vlivu této látky na lidské buňky v laboratorních podmínkách byl proveden MTT test. Buněčná linie SNU475 byla vystavena působení 1%, 0,1% a 0,01% koncentraci testované parfémované vody. Působení látky bylo monitorováno také v závislosti na době působení. V metodické části byl popsán princip a postup této analytické metody. Během laboratorních testů ke zjištění působení endokrinního disruptoru byla zaznamenána postupná redukce buněčné kultury.

The bachelor thesis deals with endocrine disruptors. The theoretical part is devoted to definition, classification and occurrence. It also describes the mechanisms of action of endocrine disruptors on human health, especially on the male and female reproductive system, and at the same time provides basic information on possible consequences of exposure. Diagnostic methods for monitoring these substances are also presented. The experimental part was carried out in the cell culture laboratory and focused on mastering the techniques necessary for laboratory work with cell cultures (sterile work in a laminar box, preparation of growth media, ensuring growth conditions, subsequent preparation of slides and cell counting in a Bürker chamber). Subsequently, the effects of perfumed water, as an endocrine disruptor, on the cell culture were tested and their activity was monitored microscopically at time intervals of 24 hours, 3 days and 7 days after application of perfumed water under the microscope. To determine the effect of this substance on human cells under laboratory conditions, an MTT assay was performed. The hepatocyte cell line SNU475 was exposed to 1%, 0.1% and 0.01% concentration of the tested perfumed water. The effect of the substance was also monitored as a function of exposure time. The principle and procedure of this analytical method was described in the method section.At the end of the experiment, the activity of the cells was measured at different concentrations of the endocrine disruptor using the MTT assay on the Elisa Reader Synergy HT instrument. During the laboratory tests to detect the action of the endocrine disruptor, a gradual reduction in cell cultureconcentration was observed. An MTT assay was performed to evaluate the effect of perfumed water on the SNU475 cell line.