Detekce galektinů ve vybraných nádorových buněčných liniích

Abstract

Galektiny se vyskytují v různých organismech a patří mezi skupinu proteinů, které dokáží rozpoznávat a vázat sacharidy. Jejich hlavní funkční doménou je doména vázající sacharidy, která specificky váže β-galaktosidy. Existují tři základní strukturní typy: prototypický, tandemový a chimerický. Vyskytují se v různých orgánech a buněčných kompartmentech, od kterých se odvíjí jejich další funkce. Fyziologicky se účastní prozánětlivé i protizánětlivé reakce, sestřihu pre-mRNA nebo mezibuněčné adheze. Galektiny hrají významnou roli také v progresi nádorových onemocnění. Jejich změněné hladiny jsou spojeny s angiogenezí, transformací buněk, regulací apoptózy, ovlivněním metabolismu rakovinných buněk nebo tvorbou metastáz. Mohou však mít i opačný účinek a nádorová onemocnění potlačovat. V současnosti je kladen důraz především na možnost jejich budoucího využití pro imunoterapii a také jako nádorových markerů. V rámci praktické části této práce byly kultivovány nádorové buněčné linie MCF7, SW620, DLD-1 a A549. Následně byla pomocí metody Western blot s imunodetekcí zkoumána přítomnost galektinů-1, -3, -4, -8 a -9. Získané poznatky byly porovnány s literaturou a bylo vyvozeno, jakým způsobem který galektin specifickou linii ovlivňuje, pokud se v ní vyskytuje.

Galectins appear in many different organisms and belong to a family of proteins that are able to recognize and bind carbohydrates. Their main protein domain is the carbohydrate recognition domain, which specifically binds β-galactosides. There are three main structural types of galectins: prototype, tandem and chimera. Galectins are found in various organs and cellular compartments, which then determine their further purpose. Biologically, they participate in both inflammatory and anti-inflammatory response, pre-mRNA splicing or intercellular adhesion. Galectins also play an important role in the progression of cancer. Their altered levels are connected with pathological angiogenesis, cellular transformation, regulation of apoptosis, deregulation of cancer cell metabolism or metastases formation. They can, however, also have the oposite effect on cancer and supress the progression of the disease. Currently the main attention is focused on the possible future use of galectins in immunotherapy and also their use as tumor markers. In the experimental part of this thesis, MCF7, SW620, DLD-1 and A549 cancer cell lines were cultivated. The presence of galectin-1, -3, -4, -8 and -9 was examined in these cell lines, using Western blotting and immunodetection. The obtained results were then compared with the literature and the way how the presence of a particular galectin affects a specific cell line was discussed.