Indukce apoptózy v buňkách meduloblastomu při ozařování v klinických podmínkách na Leksellově gama noži Perfexion

Abstract

Radiobiologii lze využít k získávání nových poznatků pro léčbu nádorových onemocnění. V této práci jsou k tomuto účelu použity nádorové kmenové buňky DAOY meduloblastomu. Je zde představena radioterapie, radiochirurgie a stereotaktická radiochirurgie se zaměřením na popis Leksellova gama nože (LGK). Dále se práce zabývá buněčnou odezvou na ozáření, buněčným přežitím a popisem způsobů buněčné smrti, zejména apoptózy. Je představena použitá buněčná linie DAOY a její kultivace v adherentních a suspenzních podmínkách. Hlavním cílem této diplomové práce bylo provedení experimentů na LGK, jenž se používá v klinické praxi, a tak byl nutný převoz buněčných kultur mezi laboratoří na ODZ AV ČR a LGK v Nemocnici Na Homolce (NNH). Delší doba experimentu včetně transportu mezi laboratoří a NNH, po kterou jsou buňky drženy v pro ně nepříznivých podmínkách, způsobuje nežádoucí stres. Podmínky pro kultivaci kultury v suspenzi byly nalezeny a následně byly porovnány s kultivací v adherentních podmínkách. Z výsledků vyplynulo, že obě zmíněné možnosti kultivace mají podobně dobré přežití rakovinných kmenových buněk. Proto mohla být v našich experimentech použita kultivace v suspenzních podmínkách. Ze statisticky zpracovaných indukcí apoptózy vyplývá teorii odpovídající závěr rostoucí tendence se zvětšující se obdrženou dávkou. Obdobně teorii odpovídá i závěr pro statisticky zpracované křivky přežití, kde byla potvrzena klesající tendence se zvětšující se obdrženou dávkou. Vliv dávkového příkonu se nepodařilo prokázat.

Radiobiology can be used for acquiring knowledge for a cancer treatment. In this thesis, DAOY tumour cells are utilised. Radiotherapy, radiosurgery and stereotactic radiosurgery focused on the Leksell gamma knife (LGK) is introduced. Further, it describes response of cells to irradiation, cell survival and cell death especially apoptosis. The DAOY cell line and its adherent and suspense condition cultivation is introduced. The main objective was the realisation of experiments using the LGK, which is utilised in clinical practice, thus a cell transport between the ODZ of the CAS and the LGK in Na Homolce Hospital was necessary. The duration of experiment and the transportation causes unfavourable stress. The conditions for adherent and suspense conditions were found and compared. The results show the fact that the both attitudes have similar cell survival rate. That is the reason why the suspense conditions could be used in our experiments. From the statistically processed data of induction of apoptosis we get increase if the received dose grows. Similarly, the experiments prove theory of survival curve, its decrease if the received dose grows. The influence of dose rate was not proved.