Imunomodulační vlastnosti HLY+ a HLY- mutanty Escherichia coli O83:K24:H31

Abstract

Vzhledem k nezralosti imunitního systému novorozence je mikrobiální stimulace značným přínosem při zajišťování fyziologických funkcí imunity. Vlivné působení střevních mikroorganismů je popsáno v mnoha medicínských odvětvích. Snížením přirozených bakteriálních stimulů může docházet k narušení rovnováhy vedoucí ke stimulaci Th2 imunologické odpovědi a rozvoji alergických onemocnění, jejichž incidence se stále zvyšuje. Předchozí studie popsali výhodné vlastnosti bakterie Escherichia coli O83:K24:H31 (E. coli O83), užité jako probiotikum, při podání novorozencům, jako prevence vzniku alergií. E. coli O83 je gram negativní bakterie, obsahující virulentní faktor hemolyzin. Toxin hemolyzin patří mezi cytolysiny, které mohou vyvolat cytolýzu buněk. Vzhledem k charakteru citlivé skupiny příjemců těchto probiotik, by mohlo být žádoucí podávání této bakterie bez přítomnosti toxinu hemolysinu (HLY-). Pro potvrzení obdobné kvality E. coli O83 HLY-, byl porovnán vliv těchto dvou variant E. coli O83 na indukci maturace dendritických buněk získaných z monocytů (moDCs) z pupečníkové krve novorozenců in vitro. Způsobilost E. coli O83 bez hemolyzinu stimulovat in vitro kultivované dendritické buňky z prekurzorů v pupečníkové krvi byla posouzena pomocí průtokové cytometrie. Výsledky prokázaly analogické imunostimulační vlastnosti E. coli O83 HLY-, jako jsou stimulační vlastnosti E. coli O83 HLY+ na moDCs. Jako znak poukazující na maturaci dendritických buněk byl použit CD83.

Considering the immature immune system of the newborn, microbial stimulation is a significant benefit in providing the physiological functions of the immune system. The influential action of the intestinal microorganisms is described in many medical disciplines. Reduced natural bacterial stimuli could support the distribution of homeostasis leading to the stimulation of Th2 immunological response and the development of allergic diseases whose incidence is increasing. Previous studies have described the beneficial properties of Escherichia coli O83:K24:H31 (E. coli O83) used as probiotic administered to the newborns to prevent allergy rise. E. coli O83 is Gram negative bacteria containing hemolysin as a virulence factor. Toxin hemolysin is one of the cytolysins that can cause cell cytolysis. Because of the character of the sensitive recipients group of probiotics it would be desirable to administer these bacteria without hemolysin (HLY-). To confirm similar quality of E. coli O83 HLY-, the effect of both variants of E. coli O83 on induction of maturation of dendritic cells derived from monocyte precursors from cord blood of the newborns was compared in vitro. The ability of E. coli O83 without hemolysin to stimulate in vitro cultured dendritic cells from umbilical cord blood precursors was assessed by the flow cytometry. The results demonstrated the analogous stimulatory capacity of E. coli HLY- as stimulatory properties of E. coli HLY+ on moDCs. CD83 was used as a marker indicating dendritic cell maturation.