Určení stability modelových fosfolipidových membrán pomocí fluorescenční korelační spektroskopie

Abstract

Předmětem této bakalářské práce je pozorování stability modelových fosfolipidových membrán, které jsou značeny fluorescenčními barvivy. V práci jsou studovány fosfolipidové dvojvrstvy ve formě lipozomů, které představují jeden z nejjednodušších experimentálních modelových systémů pro výzkum biofyzikálních vlastností buněčné membrány. Pro studium stability biomembrán je v této práci použita fluorescenční korelační spektroskopie (FCS) pro svoji vysokou citlivost a možnost kvantitativně studovat difúzní procesy. V práci je popsána struktura a funkce fluorescenčního konfokálního mikroskopu, dále pak příprava zkoumaných vzorků měřených metodou FCS a analýza dat. Na základě pozorování chování lipozomů po dobu sedmi dnů bylo zjištěno, že stabilitu vykazují vzorky, obsahující poměr lipidů 3:1 (POPC:DOPS). Naopak vzorky s poměrem lipidů 2:1 sedmidenní stabilitu nepotvrdily.

The aim of this bachelor thesis is observation of stability of the phospholipid bilayers, which are marked by fluorescent dyes. In this thesis, the bilayers are studied in the form of liposomes, which represent one of the simplest experimental model systems for the research of the biological properties of the cell membrane. For the study of stability of biomembranes, fluorescence correlation spectroscopy (FCS) is used for its high sensitivity and the ability to quantitatively study diffusion processes. The thesis describes the structure and function of the fluorescent confocal microscope, the preparation of the studied samples measured by the FCS method and the data analysis. Based on the seven day observation of liposome behavior, it can be concluded that samples with a 3:1 ratio of POPC:DOPS lipids are stable, on the contrary the samples with a 2:1 ratio failed to show the seven day stability.