Porovnání fluorescenčních spekter zdravých a nádorových buněčných kultur
Comparison of fluorescence spectra of healthy and carcinoma cell cultures
Typ dokumentu
diplomová prácemaster thesis
Autor
Sio Ratanak
Vedoucí práce
Pospíšilová Marie
Oponent práce
Macháň Radek
Studijní obor
Přístroje a metody pro biomedicínuStudijní program
Biomedicínská a klinická technikaInstituce přidělující hodnost
katedra přírodovědných oborůObhájeno
2018-06-19Práva
A university thesis is a work protected by the Copyright Act. Extracts, copies and transcripts of the thesis are allowed for personal use only and at one?s own expense. The use of thesis should be in compliance with the Copyright Act http://www.mkcr.cz/assets/autorske-pravo/01-3982006.pdf and the citation ethics http://knihovny.cvut.cz/vychova/vskp.htmlVysokoškolská závěrečná práce je dílo chráněné autorským zákonem. Je možné pořizovat z něj na své náklady a pro svoji osobní potřebu výpisy, opisy a rozmnoženiny. Jeho využití musí být v souladu s autorským zákonem http://www.mkcr.cz/assets/autorske-pravo/01-3982006.pdf a citační etikou http://knihovny.cvut.cz/vychova/vskp.html
Metadata
Zobrazit celý záznamAbstrakt
Bioflurescence je emise světla v UV, VIS a blízké IČ ve které emitují biologické materiály (buňky) při excitaci vhodnou vlnovou délkou. Přítomnost a vzájemné vazby biofluoroforů v živých organismech ovlivňují jejich emisní spektra a jsou tedy možným nástrojem ke studiu biologických materiálů. Mezi biofluorofory, obsaženém v buňce, patří NADH, který je důležitým prvkem v metabolismu buňky při tvorbě ATP. Proto byl vybrán jako indikátor pro porovnání spekter zdravé a nádorové buněčné kultury. V práci jsou porovnána emisní spektra zdravých 3T3 a nádorových CT26 buněk stejného typu. Excitační vlnové délky 260nm, 340nm a 365nm, shodné s absorpčními maximy NADH, byly použity pro experimenty. Buněčné kultury byly kultivovány standardně v DMEM (M.I. a M.II.) a pro měření připraveny jako suspenze v PBS s pH7 s definovanými koncentracemi 1,25E4 a 5E4 buněk/ml. Emisní spektra byla měřena na spektrofluorometr Fluoromax-4 v spektrálním rozsahu 380nm až 600nm. Naměřená spektra byla zpracována programem GASpeD, který umožnil rozložit spektrum na jednotlivé příspěvky od biofluoroforů obsažených v buňce v oblasti maximální emise NADH na 460 nm. Cílem práce bylo porovnat emisní spektra zdravých a nádorových buněk a tyto rozdíly využít k diagnostickým metodám. Výsledky porovnání spekter ukazují, že rozdíly jsou v intenzitě fluorescence a v některých případech i v posunu maxim u sledovaných vlnových délek. Na metabolické úrovni byl pozorován větší narůst intenzity fluorescence v oblasti kolem 460nm u nádorových, než u zdravých buněk, což je v souladu s literaturou. Je uvedena závislost intenzity fluorescence na vlnové délce 460 nm naměřené a určené pomocí GASpeD, na době ozařování vzorku CT26 s PpIX excitovaném na 350 nm. Závislost určená na základě GASpeD má odpovídající klesající tendenci, což odpovídá očekávání. Bioflurescence is the emission of light in UV, VIS, and near IR emitted by biological materials (cells) at a suitable excitation wavelength. The presence and interrelation of biofluorophores in living organisms influences their emission spectra and is therefore a possible tool for the study of biological materials. Among the biofluorophores contained in the cell are NADH, which is an important element in cell metabolism in ATP production. Therefore, it was chosen as an indicator for the comparison of the spectrum of healthy and tumor cell culture. In this work the emission spectra of healthy 3T3 and tumor CT26 cells of the same type (fibroblasts) are compared. Excitation wavelengths of 260nm, 340nm and 365nm, identical to the NADH absorption maxima, were used for experiments. Cell lines were cultivated as standard in DMEM (M.I. and M.II.) and prepared as a suspension in PBS with pH7 at defined concentrations of 1.25E4 and 5E4 cells/ml. Emission spectra were measured on spectrofluorometer Fluoromax-4 in a spectral range of 380nm to 600nm. The measured spectra were processed by the GASpeD program, which allowed the spectrum to be decomposed to individual contributions from the biofluorophores contained in the cell in the area of NADH emission maximum 460nm. The aim of this work was to compare the emission spectra of healthy and tumor cells and use these differences for diagnostic methods. The results of the comparison spectra show that the differences are the fluorescence intensity and in some cases also the shift of emission maxima at the specific wavelengths. At the metabolic level, a greater increase in fluorescence intensity was observed in the area of wavelength around 460nm in the tumor than in healthy cells, which is consistent with the literature. The time dependence of fluorescence intensity at the wavelength of 460 nm of the carcinoma cells CT26,after applying PpIX and irradiated, at the excitation wavelength of 350 nm was shown from the measured data and the decomposition of GASpeD. Time dependence determined by GASpeD has shown the declining tendency, which corresponds to expectations.
Kolekce
- Diplomové práce - 17101 [236]
Související záznamy
Zobrazují se záznamy příbuzné na základě názvu, autora a předmětu.
-
Fotoluminiscence funkcionalizovaných nanočástic
Autor: Novák Tomáš; Vedoucí práce: Remeš Zdeněk; Oponent práce: Holovský Jakub
(České vysoké učení technické v Praze. Vypočetní a informační centrum.Czech Technical University in Prague. Computing and Information Centre., 2016-05-19)Motivací pro studium fluorescenčních nanokrystalických diamantů je jejich potenciál pro nejrůznější aplikace v biomedicíně a to především jako fluorescenční sondy a biosenzory. Cílem této práce je studium fotoluminiscence ... -
Časově rozlišená luminiscenční spektroskopie core-shell diamantovvých nanočástic
Autor: Adelt Milan; Vedoucí práce: Pánek Dalibor; Oponent práce: Dvořák Miroslav
(České vysoké učení technické v Praze. Vypočetní a informační centrum.Czech Technical University in Prague. Computing and Information Centre., 2017-05-18)Tato diplomová práce uvádí studii zabývající se heterogenitou doby života fluorescence center dusík-vakance ve fluorescenčních diamantových nanočásticích. Práce dále uvádí metodologii vytvořenou pro měření a vyhodnocení ... -
Vizualizace meziproduktů spalování při procesu hoření plynné směsi
Autor: Mulenko Martin; Vedoucí práce: Kouba Jan; Oponent práce: Polanský Jiří
(České vysoké učení technické v Praze. Vypočetní a informační centrum.Czech Technical University in Prague. Computing and Information Centre., 2018-09-09)Práce se zabývá vizualizací meziproduktů spalování při procesu hoření plynné směsi. Jsou zde shrnuty fyzikální základy luminiscenčních jevů, jako je luminiscence, fluorescence nebo chemiluminiscence. Tyto poznatky jsou ...