Současné možnosti laboratorní diagnostiky Xabanů - přímých inhibitorů F Xa (DOAC)

Abstract

Předmětem bakalářské práce bylo zhodnocení možností laboratorní diagnostiky a monitorace přímých orálních antikoagulancií (dále jen DOAC, Direct Oral Anticoagulant). Byl též zmíněn diagnostický přínos monitorace DOAC neboli nových perorálních antikoagulancií (dále jen NOAC, New Oral Anticoagulant, někdy též Non Warfarin Oral Anticoagulant). Přestože léčba xabany primárně nevyžaduje rutinní monitorování, je možné antikoagulační účinek ihned ověřit pomocí kalibrované anti-FXa aktivity, což může pomoci při klinickém rozhodování v případě nečekaného předávkování pacienta nebo při urgentním chirurgickém zákroku. V teoretické části jsem se zabývala charakteristikou, indikací, dávkováním a laboratorní monitorací jednotlivých xabanů a zmínila jsem i klasická antikoagulancia. Také jsem se zaměřila na popis hemostázy a jejich poruch, dotkla jsem se trombofilních stavů a také stavů spojených se zvýšeným rizikem krvácení, které se léčby pomocí DOAC také dotýkají. V mé bakalářské práci jsem řešila i možnosti zvrácení antikoagulačního účinku xabanů a dalších antikoagulancií při urgentních stavech (polytraumata, rozsáhlá krvácení) a zmínila jsem současnou dostupnost specifických antidot. V praktické části jsem zmínila preanalytickou fázi, analytickou fázi a postanalytickou fázi vyšetřovaného vzorku. V analytické fázi byl ve vzorcích pacientů měřen protrombinový čas ratio (dále jen PT-R) a aktivita Anti-Xa. na ACL TOP 500 CTS (Instrumentation Laboratory - IL) ve vzorku plazmy obsahující citrát sodný. Aktivita Anti-Xa byla měřena pomocí soupravy Liquid Anti-Xa (IL) a PT-R pomocí soupravy RecombiPlasTin 2G (IL) Ve výsledcích byla aktivita Anti-Xa naměřena na 74 vzorcích plazmy (25 vzorků pacientů užívajících apixaban, 42 vzorků pacientů užívajících rivaroxaban a 7 vzorků obsahujících edoxaban) a PT-R na 75 vzorcích plazmy (21 užívajících apixaban, 37 užívajících rivaroxaban a 17 vzorků obsahujících edoxaban) Cílem mé bakalářské práce bylo najít vztah mezi plazmatickými koncentracemi xabanů (rivaroxaban, apixaban a edoxaban) kalibrovanými na test anti-Xa pomocí soupravy IL a nejrozšířenějším hemokoagulačním screeningovým měřením-protrombinovým testem (PT-Ratio) za použití lidského rekombinantního tromboplastinu. Tyto vztahy jsem zpracovala graficky a odvodila pravidla. Získané závěry jsem porovnala s dostupnou literaturou. Závěrem lze říci, že podle dostupných zdrojů je na PT-R nejcitlivější rivaroxaban, edoxaban jsme vyhodnotit nemohli, jelikož jsme vzorky pacientů užívající edoxaban prozatím neměli. Proto jsme pro edoxaban měřili pouze komerčně dodávané plazmy ředěné normální plazmou. Dostupná literatura přitom udává, že na PT-R je edoxaban o trochu méně citlivější než rivaroxaban. Apixaban je podle dostupných zdrojů citlivý nejméně, s čímž se naše data shodují. Test Anti-Xa se ukázal být nejcitlivějším testem pro stanovení antikoagulačního účinku xabanů, tak jak jsme očekávali.

The subject of my bachelor thesis is to assess the possibility of laboratory diagnostics and monitoring of Direct Oral Antikoagulants (in following part DOAC). The value of diagnostics of DOAC alias Novel Oral Antikoagulants (in following part NOAC, New Oral Anticoagulant, alias Non Warfarin Oral Anticoagulant) monitoring has also been mentioned. Although the treatment by xaban primarily does not require any monitoring, we can verify the anticoagulant effect by using calibrated analysis of Anti-Xa. It can be useful during clinical decisions in case of unexpected overdose or urgent surgical intervention. In the theoretical part of my bachelor thesis I was looking into characteristics, indications, dosages, and into laboratory monitoring for individual xabans. I also mentioned the classical anticoagulant therapy. Moreover, I also looked into hemostasis, thrombophilia and conditions with increased risk of bleeding which can be caused by the DOAC treatment. Another researched topic was the possibility of reversing anticoagulant function of xabans and other effects during an urgent situation (polytrauma, serious bleeding) and accessibility of specific antidote. The practical part was focused on the preanalytical phase, the analytical phase and the postanalytical phase. The analytical phase was focused on the measurement of PT-R (in following part prothrombin time ratio) and anti-Xa activity of tested in samples of patients. The measurement of PT-R and Anti-Xa was realised with the system ACL TOP500 CTS ((Instrumentation Laboratory-IL). For the measurement of Anti-Xa I used liquid Anti-Xa (IL), and for the measurement of PT-R. I used RecombiPlastTin 2G IL) The results showed Anti-Xa activity in 74 plasma samples of patients (25 samples using apixaban, 42 samples using rivaroxaban and 7 samples containing edoxaban) and PT-R was present in 75 plasma samples of patients (21 samples using apixaban, 37 samples using rivaroxaban and 17 samples containing edoxaban). The goal of my bachelor thesis was to find a relation between the plasma concentration of xabans (rivaroxaban, apixaban and edoxaban) calibrated by IL set for Anti-Xa test and the most common hemocoagulation screening test, the protrombin test (PT-ratio), using human recombinant thromboplastin. The findings based on these relations shall be graphically visualised and the possible rules shall be derived. The conclusion reached in the findings was compared with accessible technical articles. To conclude, I can state that based on the available sources rivaroxaban is the most sensitive to PT-R. I was not able to evaluate impacts of edoxaban due to the lack of patients using edoxaban. I managed to measure only commercial plasma diluted with normal plasma. Available technical literature describes that edoxaban is only slightly less sensitive to PT, than rivaroxaban. Based on the used sources, apixaban is the least sensitive to PT-R, which correlates with our data. The Anti-Xa assay proved to be the most sensitive test to determine the anticoagulation effect of xabans.