Spektroskopie NADH

Abstract

Vuvedené práci byly zpracovány kapitoly věnující se hlavním principům fluorescenční spektroskopie. Dále je zde představen koenzym NADH a jeho fluorescenční vlastnosti i projevy, jakožto velmi důležité látky, na jejíž přítomnosti lze diagn ostikovat buněčný život či smrt. Byl vypracován postup přípravy vzorků NADH, tryptofanu a pyridoxinu pro měření závislosti intenzity fluorescence těchto fluoroforů na zvolených koncentracích a teplotách. Postup tohoto měření byl proveden na fluorimetru Fl uoromax-4. Měření bylo provedeno sčistými, komerčně dostupnými látkami NADH, pyridoxinem a tryptofanem, u nichž byly zjištěny a detailně popsány funkční závislosti intenzit fluorescence na daných koncentracích a teplotách. Byly také určeny optimální rozs ahy koncentrací pro měření fluorescence těchto látek. Vrámci uvedené práce bylo dále vytvořeno srovnání komerčně dostupných fluorescenčních spektrometrů dle parametru S/N udávajícího citlivost těchto přístrojů.

In this bachelor thesis were processed chapters which are devoted to main principles of fluorescence spectroscopy. There is introduced coenzyme NADH and its fluorescence properties, as a very important substance, on which presence it is possible to diagnose cellular life or death. Sample preparation procedures of NADH, tryptophan and pyridoxine were developed to measure concentration and temperature dependence of fluorescence intensity of these fluorophores. The procedure of this measurement was performed on a Fluoromax -4 fluorimeter. Measurements were performed with pure, commercially available substances NADH, pyridoxine and tryptophan. Functional dependences of fluorescence intensity on the given concentrations and temperatures were described in detail. There were also determined optimal concentration ranges for fluorescence measurement of these substances. As a part of this work was further formed a comparison of commercially available fluorescence spectrometers according to parameter signal to noise ratio which indicates the sensitivity of these devices.